本品系自猪胰中提取的蛋白酶。每1mg蛋白含胰激肽原酶的活力不得少于300单位（供口服用）或600单位（供注射用）。 【制法要求】本品应从检疫合格的猪胰中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品来源于动物，在生产过程中应采用适宜的病毒灭活工艺等方法进行病毒安全性控制。 【性状】本品为白色或类白色粉末;无臭。 本品在水中易溶，在乙醇或乙醚中几乎不溶。 【鉴别】（1）照紫外-可见分光光度法（通则0401）测定。 供试品溶液 取已测得效价的本品适量，精密称定，加纯度项下的磷酸盐缓冲液（pH7.0）溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。精密量取4ml，置10ml量瓶中，用上述磷酸盐缓冲液（pH7.0）稀释至刻度。 测定法 取效价测定酶活力项下的底物溶液2.9ml，在30℃±0.5℃预热5分钟，置1cm比色池中，精密加入供试品溶液0.1ml，混匀，立即计时，使比色池内的温度保持在30℃±0.5℃，在253nm的波长处测定，以上述磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1ml代替供试品溶液，同法操作，作为空白对照。准确读取4分钟时的吸光度（A4）和6分钟时的吸光度（A6）。求得A值[（A6－A4/2]，按下式计算。 式中 a为供试品溶液每1ml中的毫克数； b为供试品每1mg的效价单位数。 结果判定 R值（水解速率）应为0.12～0.17。 （2）在纯度项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 【检查】酸碱度 取本品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中含300单位的溶液，依法测定（通则0631），pH值应为5.5～7.5。 溶液的澄清度 取本品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中含2mg的溶液，依法检查（通则0902第一法），溶液应澄清。（供注射用） 脂肪 取本品1.0g，置具塞锥形瓶中，加乙醚20ml，密塞，时时旋动，放置约30分钟后，将乙醚液倾至用乙醚润湿的滤纸上，滤过，再用乙醚10ml洗涤残渣，合并滤液及洗液至已恒重的蒸发皿中，除去乙醚，在105℃干燥2小时，精密称定，遗留脂肪不得过5mg。 相关蛋白酶 照紫外-可见分光光度法（通则0401）测定。 供试品溶液 取本品适量，加纯度项下的磷酸盐缓冲液（pH7.0）溶解并稀释制成每1ml中含1单位的溶液。 测定法 精密量取供试品溶液1ml置试管中，在35℃±0.5℃水浴中保温5分钟，精密加入已预热至35℃±0.5℃的酪蛋白溶液（取酪蛋白0.6g，加0.05mol/L磷酸氢二钠溶液80ml，65℃加热溶解，放冷，调节pH值至8.0，用水稀释至100ml，临用前配制）5ml，混匀，于35℃±0.5℃水浴中准确反应20分钟，再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml，混匀，滤过，取续滤液作为测定溶液；另精密量取供试品溶液1ml，置试管中，精密加入5%三氯醋酸溶液5ml，混匀，于35℃±0.5℃水浴中准确反应20分钟，再精密加入上述酪蛋白溶液5ml，混匀，滤过，取续滤液作为空白，在2小时内，在280nm的波长处分别测定吸光度。 限度 吸光度不得过0.2。 纯度 照高效液相色谱法（通则0512）测定。 磷酸盐缓冲液（pH7.0） 取磷酸氢二钠10.9g，磷酸二氢钠2.3g，加水溶解并稀释至1000ml，用50%磷酸溶液调节pH值至7.0。 供试品溶液 取本品适量，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含200单位的溶液。 对照品溶液 取胰激肽原酶对照品（纯度应大于95%）适量，加流动相A溶解并定量稀释制成每1ml中约含200单位的溶液。 色谱条件 用疏水性凝胶为填充剂（TSKgel Phenyl-5PW，7.5mm×75mm，10μm或其他适宜的色谱柱）；以含1.7mol/L硫酸铉的磷酸盐缓冲液（pH7.0）为流动相A，以磷酸盐缓冲液（pH7.0）为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温为25℃;流速为每分钟0.5ml；检测波长为280nm；进样体积20μl。 系统适用性要求 理论板数按胰激肽原酶峰计算不低于1500，胰激肽原酶主峰与相邻杂质峰之间的分离度不得低于0.8。 测定法 精密量取流动相A、供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。将供试品溶液与对照品溶液的色谱图扣除流动相A色谱图（作为空白基线），进行基线校正。 限度 供试品溶液色谱图中，量取空白基线拐点（约16分钟）后所有色谱峰面积，按面积归一化法计算，与对照品溶液主峰保留时间一致的主峰面积不得低于75%（供口服用）或90%（供注射用）。 干燥失重 取本品0.50g，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥4小时，减失重量不得过5.0%（通则0831）。 炽灼残渣 取本品0.50g，依法检查（通则0841），遗留残渣不得过3.0%。 细菌内毒素 取本品，依法检查（通则1143），每1单位胰激肽原酶中含内毒素的量应小于2.5EU。（供注射用） 【效价测定】酶活力 照紫外-可见分光光度法（通则0401）测定。 供试品溶液 取本品适量，精密称定，加纯度项下的磷酸盐缓冲液（pH7.0）适量使溶解并定量稀释制成每1ml中约含10单位的溶液。 标准品溶液 取胰激肽原酶标准品，按标示单位，加上述磷酸盐缓冲液（pH7.0）适量使溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。 底物溶液 取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐17.7mg，加三羟甲基氨基甲烷缓冲液（称取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml溶解，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，用水稀释至1000ml）适量使溶解并稀释至100ml，4℃保存。 测定法 取25℃±0.5℃水浴中预热的底物溶液2.5ml，置1cm比色池中，分别精密加入供试品溶液或标准品溶液0.1ml，混匀，立即计时，使比色池内的温度保持在25℃±0.5℃，在253nm波长处，以底物溶液为空白，准确读取1分钟时的吸光度A0和3分钟时的吸光度A，标准品溶液和供试品溶液需平行测定3次，分别求得标准品溶液和供试品溶液的ΔA值（ΔA=A－A0）的平均值，代入下式计算。 蛋白含量 取本品约10mg，精密称定，照蛋白质含量测定法（通则0731第一法）测定，即得。 比活 由测得的酶活力和蛋白含量计算每1mg蛋白中含胰激肽原酶的单位数，即得。 【类别】血管舒张药。 【贮藏】遮光，密封，在阴凉干燥处保存。 【制剂】胰激肽原酶肠溶片 |
医药数据
