本品系用纯化白喉毒素经稀释制成，用于测定人体对白喉的敏感性。 1基本要求 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2制造 2.1菌种 生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理及质量控制”的有关规定。 2.1.1名称及来源 采用白喉杆菌PW8株（CMCC38007）或由PW8株筛选的产毒高、免疫力强的菌种，或其他经批准的菌种。 2.1.2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理及质量控制”的有关规定。 2.1.3种子批的传代 主种子批自启开后传代应不超过5代。 2.1.4种子批的检定 2.1.4.1培养特性 在吕氏琼脂培养基上生长的菌落应呈灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐；在亚碲酸钾琼脂培养基上生长的菌落应呈灰黑色、具金属光泽；在血琼脂培养基上生长的菌落应呈灰白色、不透明、不产生α溶血素。 2.1.4.2染色镜检 革兰氏染色阳性，具异染颗粒；菌体呈一端或两端膨大、杆状，菌体排列呈栅栏状、X状或Y状。 2.1.4.3生化反应 发酵葡萄糖、麦芽糖、半乳糖，均产酸不产气；不发酵蔗糖、甘露醇、乳糖（通则3605）。 2.1.4.4 特异性中和反应 接种于Elek's琼脂培养基上，可见明显白色沉淀线。 2.1.5 种子批的保存 种子批应冻干保存于8℃以下。 2.2 原液 2.2.1 生产用种子 工作种子批检定合格后方可用于生产。由工作种子批传代至适宜的培养基，然后传代至产毒培养基种子管2～3代，再传代至产毒培养基培养制成。 2.2.2培养基 采用胰酶牛肉消化液培养基或经批准的其他适宜培养基，但不得采用含马肉或其他马体组织的培养基。 2.2.3接种和培养 将生产用种子接种于产毒培养基，经适宜温度、时间培养后，澄清、除菌，即得毒素，其效价应不低于150Lf/ml。制备过程应避免杂菌污染，经镜检发现已污染者应废弃。 2.2.4精制 2.2.4.1毒素可采用硫酸铵盐析、活性炭吸附法或经批准的其他方法纯化。用于纯化的毒素可多批混合，但不得超过5批。 2.2.4.2毒素纯化后应经除菌过滤。用同一菌种、培养基处方和纯化方法制造的毒素，在同一容器内混合均匀后除菌过滤，即为一批原液。原液应经2～8℃保存适当时间，使其毒力稳定后，方可用于半成品配制。 2.2.5原液检定 按3.1项进行。 2.3半成品 2.3.1配制 将原液测毒后稀释至0.2MLD/ml。稀释液可采用甘油-明胶-硼酸盐缓冲液，或经批准的其他无致敏性的适宜缓冲液。 2.3.2半成品检定 按3.2项进行。 2.4成品 2.4.1分批 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。 2.4.2分装 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。 2.4.3规格 每瓶1ml，含白喉毒素0.2MLD。 2.4.4包装 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。 3检定 3.1原液检定 3.1.1纯度 每1mg蛋白氮应不低于2000Lf（通则3506）。 3.1.2毒力测定 应为25～50MLD/Lf。 3.2半成品检定 3.2.1外观检查 应为无色或淡乳白色澄明液体，无沉淀或其他异物。 3.2.2 pH值 应为7.2～8.2（通则0631）。 3.2.3效力测定 3.2.3.1 MLD测定 选用体重为240～270g的豚鼠4只，每只于腹部皮下注射本品5ml，至少应有3只在注射后72～96小时死亡，另1只可在72小时内或96小时后死亡。即本品含纯化白喉毒素约0.2MLD/ml。 3.2.3.2结合力测定 将白喉抗毒素标准品稀释至1/75IU/ml及1/125IU/ml，加等量本品，置室温或37℃中和30分钟后，皮内注射2只体重为2～3kg的家兔各0.2ml，72小时判定结果。注射含1/1250IU白喉抗毒素中和液的部位应呈10mm×10mm或稍强的红肿反应，含1/750IU白喉抗毒素中和液的注射部位应无反应。 3.2.4稳定性试验 本品于37℃放置24小时，其效力应符合3.2.3项规定。 3.2.5无菌检查 依法检查（通则1101），应符合规定。 3.3成品检定 3.3.1鉴别试验 按3.2.3.2项进行，应符合规定。 3.3.2物理检查 3.3.2.1外观 应为无色或淡乳白色澄明液体，无沉淀或其他异物。 3.3.2.2装量 依法检查（通则0102），应不低于标示量。 3.3.3化学检定 pH值应为7.2～8.2（通则0631）。 3.3.4效力测定 按3.2.3项进行，应符合规定。 3.3.5无菌检查 依法检查（通则1101），应符合规定。 4保存、运输及有效期 于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为24个月。 5使用说明 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定和批准的内容。 |
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