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升压素生物测定法

    药品名称: 1205 升压素生物测定法
    版本: 2020年版
    来源: 四部
    分类: 通则
    内容:

    本法系比较赖氨酸升压素标准品(S)与供试品(T)两者引起大鼠血压升高的程度,以测定供试品的效价。

    标准品溶液的制备 试验当日,取赖氨酸升压素标准品,加氯化钠注射液制成两种浓度的稀释液,高低剂量的比值(r)一般不得大于1∶0.6,调节剂量使低剂量能引起血压升高,高剂量应不致使血压升高达到极限。

    供试品溶液与稀释液的制备 按供试品的标示量或估计效价(AT),照标准品溶液与稀释液的制备法制成两种浓度的稀释液,其比值(r)应与标准品相等,标准品与供试品高低剂量所致的反应均值应相近。

    测定法 取健康合格,体重300g以上的成年雄性大鼠,用适宜的麻醉剂(如腹腔注射乌拉坦1g/kg)麻醉后,固定于保温手术台上,分离气管,必要时插入气管插管,以使呼吸畅通。在一侧颈静脉或股静脉插入静脉插管,供注射药液用,按每100g体重注入肝素溶液50~100单位。然后剥离另一侧颈动脉,插入与血压计相连的动脉插管,在血压计与插管通路中充满氯化钠注射液,并于动脉插管中注入适量肝素(约200~400单位)抗凝,全部手术完毕后,将血压计调节到与动物血压相当的高度,开启动脉夹,记录血压。缓缓注入适宜的交感神经阻断药(如酚妥拉明,按大鼠每100g体重注入0.1mg,隔5~10分钟用相同剂量再注射一次),待血压稳定后,即可进行药液注射,各次药液的注射速度应基本相同,并于每次注射后立即注入氯化钠注射液约0.5ml。每次注射应在前一次注射的反应基本稳定以后进行,相邻两次注射的间隔时间应相同(一般为5~10分钟)。标准品稀释液和供试品稀释液各取高低两个剂量(dS1、dS2、dT1、dT2)为一组,按随机区组设计的次序轮流注入,每组4个剂量,重复4~6组。测量各剂量所致血压升高的高度,照生物检定统计法(通则1431)中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。

    本法的可信限率(FL%)不得大于20%。

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