第一法 仪器装备 照砷盐检查法（通则0822）项下第一法的仪器装置；但在使用时，导气管C中不装醋酸铅棉花，并将旋塞D的顶端平面上的溴化汞试纸改用碱性硫酸亚铁试纸（临用前，取滤纸片，加硫酸亚铁试液与氢氧化钠试液各1滴，使湿透，即得）。 检查法 除另有规定外，取各品种项下规定量的供试品，置A瓶中，加水10ml与10%酒石酸溶液3ml，迅速将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，摇匀，小火加热，微沸1分钟。取下碱性硫酸亚铁试纸，加三氯化铁试液与盐酸各1滴，15分钟内不得显绿色或蓝色。 第二法 仪器装置 如图所示。A为200ml具塞锥形瓶；B为5ml的烧杯，其口径大小应能置于A瓶中。 标准氰化钾溶液的制备 取氰化钾25mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。临用前，精密量取5ml，置250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于2μg的CN）。 本液须临用前配制。 检查法 除另有规定外，取各品种项下规定量的供试品，置A瓶中，加水至5ml，摇匀，立即将精密加有三硝基苯酚锂试液1ml的B杯置入A瓶中，密塞，在暗处放置过夜；取出B杯，精密加水2ml于B杯中，混匀，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在500nm的波长处测定吸光度，与该品种项下规定的标准氰化钾溶液加水至5ml按同法操作所得的吸光度相比较，不得更大。 第三法 原理 在酸性条件下溴化氰与吡啶联苯胺发生显色反应，釆用紫外-可见分光光度法测定Hib多糖衍生物中溴化氰的含量。 试剂（1）60%吡啶溶液 量取吡啶30ml，加水20ml，摇匀，即得。 （2）2%盐酸溶液 量取盐酸0.5ml，加水9.5ml，摇匀，即得。 （3）吡啶联苯胺溶液 取联苯胺0.5g，精密称定，加60%吡啶溶液50ml使溶解，再加入2%盐酸溶液10ml，摇匀，即得。临用前配制。 对照溶液的制备 （1）0.1mg/ml溴化氰对照贮备液 取溴化氰10mg，精密称定，加乙腈适量使溶解，加水稀释至100ml，摇匀，即得。临用前配制。 （2）溴化氰对照工作液（500ng/ml） 精密量取溴化氰对照贮备液1ml，加水稀释至200ml，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 取多糖衍生物适量，配制成10mg/ml的溶液，即得。 测定法 量取吡啶联苯胺溶液2.0ml，加水2.0ml，混匀，20℃以下、暗处放置15分钟后，在波长520nm处测定吸光度，作为空白对照。 量取供试品溶液2.0ml，加吡啶联苯胺溶液2.0ml，混匀，20℃以下、暗处放置15分钟后，在波长520nm处测定吸光度。 分别量取溴化氰对照工作液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml于试管中，每管依次加水1.9ml、1.8ml、1.6ml、1.4ml、1.2ml、1.0ml，加入吡啶联苯胺溶液2.0ml，混匀，20℃ 以下、暗处放置15分钟后，在波长520nm处测定吸光度。 结果计算 以对照工作液中溴化氰的含量（ng/ml）对其相应的吸光度作线性回归，求得线性回归方程，将供试品溶液的吸光度代入线性回归方程，求得供试品溶液中溴化氰的含量B（ng/ml）。 式中 B为供试品溶液中溴化氰的含量，ng/ml； 10为供试品溶液中多糖衍生物的含量，mg/ml。 |
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