本品系用A血型单克隆抗体或B血型单克隆抗体配制而成，用于鉴定人ABO血型。 1 基本要求 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 专用原材料 2.1.1 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞库的建立及检定应符合“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制”规定。 杂交瘤细胞建株，需经几次克隆筛选，以100%克隆孔上清液相应抗体阳性的作为原始细胞株。原始细胞株经传代，稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株为主细胞。 工作细胞库经血凝效价测定合格后方能用于生产。 2.1.2 染色剂 抗A血型试剂可选用亚甲蓝等蓝色染料，抗B血型试剂可选用吖啶黄等黄色染料。 2.1.3 抑菌剂 可选用叠氮钠、硫柳汞钠盐等。 2.1.4 稳定剂 可选用蛋白质、葡萄糖、盐类等，不得使用凝聚胺、聚乙二醇等促凝剂用于配制稳定剂。 2.2 制备程序 2.2.1 杂交瘤细胞培养物上清液的制备 抗A血型或抗B血型杂交瘤细胞经培养传代，取培养物上清液，检测血凝效价合格后扩大培养即得。 2.2.2 小鼠杂交瘤腹水的制备 2.2.2.1 小鼠腹腔预处理 健康BALB/c小鼠腹腔用石蜡油预处理。 2.2.2.2 接种 检测杂交瘤细胞培养物上清液，其抗体血凝效价合格后，用0.85%～0.90%氯化钠溶液或不完全培养液重新悬浮细胞，接种于数天前用石蜡油处理过的小鼠腹腔内。 2.2.2.3 腹水的收集 接种后数周，处死小鼠，收集腹水，离心去沉淀，以适当方法去除纤维蛋白原，加入适宜的抑菌剂，-30℃及以下保存。 2.3 半成品 2.3.1 配制 合并杂交瘤细胞培养物上清液，可加入少量腹水混合，加入染色剂，使抗A血型定型试剂呈蓝色，抗B血型定型试剂呈黄色，除菌过滤。 2.3.2 半成品检定 按3.1项进行。 2.4 成品 2.4.1 分批 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。 2.4.2 分装与冻干 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。 2.4.3 规格 应为经批准的规格。 2.4.4 包装 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。 3 检定 3.1 半成品检定 3.1.1 效价测定 取抗A血型试剂、抗B血型试剂及国家参考品，2倍系列稀释至适宜的稀释度，分别加入相应的2%A1、A2、A2B、B血型红细胞悬液，同时设红细胞悬液对照，置18～25℃反应15分钟，以每分钟1000转离心1分钟后肉眼观察结果。红细胞悬液对照应不产生凝集，抗A血型试剂对A1、A2、A2B血型红细胞的凝集效价和抗B血型试剂对B血型红细胞的凝集效价均不得低于国家参考品的同步测定结果。 3.1.2特异性 取抗A血型试剂、抗B血型试剂，分别加入2%A1、A2B、B、O血型红细胞悬液，同时设红细胞悬液对照，置18～25℃反应15分钟，以每分钟1000转离心1分钟后肉眼观察结果。红细胞悬液对照应不产生凝集；抗A血型试剂应与A1、A2B血型红细胞产生凝集，与B、O血型红细胞不产生凝集；抗B血型试剂应与B血型红细胞产生凝集，与A1、O血型红细胞不产生凝集，且均不应出现溶血和其他不易分辨的现象。 3.1.3冷凝集素和不规则抗体测定 取3例A型（测抗B血型试剂用）、3例B型（测抗A血型试剂用）、10例O型红细胞，每一例红细胞分别用0.85%～0.90%氯化钠溶液配制成2%红细胞悬液、用20%牛血清白蛋白生理氯化钠溶液配制成5%红细胞悬液。2%红细胞悬液与相应血型试剂分别于4℃、18～25℃、37℃进行测试；5%红细胞悬液与相应血型试剂分别于18～25℃、37℃进行测试。2小时后肉眼观察结果，所有测试结果均不得产生凝集反应或溶血现象。 3.1.4无菌检查 半成品分装后留样做无菌检查，釆用直接接种法（通则1101），应符合规定。 3.1.5稳定性试验 37℃至少放置7天（有效期为1年）或14天（有效期为2年）后，应符合3.1.1～3.1.4项要求。 3.2成品检定 3.2.1物理检查 外观 抗A血型试剂应为透明或微带乳光的蓝色液体，抗B血型试剂应为透明或微带乳光的黄色液体，且均不应有摇不散的沉淀或异物。 3.2.2效价测定 按3.1.1项进行。 3.2.3特异性 按3.1.2项进行。 3.2.4冷凝集素和不规则抗体测定 按3.1.3项进行。 3.2.5亲和力 将抗A、抗B血型试剂分别与10%红细胞悬液于瓷板或玻片上混匀，抗A血型试剂与A1、A2、A2B血型红细胞出现凝集的时间应分别不长于15秒、30秒、45秒；抗B血型试剂与B血型红细胞出现凝集的时间应不长于15秒，且在3分钟内凝集块应达到1mm2以上。 2.2.6稳定性试验 出厂前进行，37℃至少放置7天（有效期为1年）或14天（有效期为2年）后，应符合3.2.1～3.2.5项要求。 4保存及有效期 于2～8℃避光保存。自包装之日起，按批准的有效期执行。 5使用说明 应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定和批准的内容。 |
医药数据
