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人免疫球蛋白类制品单体加二聚体测定法

    药品名称: 3122 人免疫球蛋白类制品IgG单体加二聚体测定法
    版本: 2020年版
    来源: 四部
    分类: 通则
    内容:

    本法系用分子排阻色谱法测定人免疫球蛋白类制品IgG单体加二聚体含量。

    照分子排阻色谱法(通则0514)测定。

    色谱条件与系统适用性试验用亲水硅胶高效体积排阻色谱柱(SEC,排阻极限300kD,粒度10μm),柱直径7.5mm、长60cm;以含1%异丙醇的pH7.0、0.2mol/L磷酸盐缓冲液(量取0.5mol/L磷酸二氢钠200ml、0.5mol/L磷酸氢二钠420ml、异丙醇15.5ml及水914.5ml,混匀)为流动相;检测波长为280nm;流速为每分钟0.6ml。分别取每lml含蛋白质12mg的人免疫球蛋白、人血白蛋白溶液各20μl,分别注入色谱柱,记录色谱图。人免疫球蛋白对照品单体峰与裂解体峰间的分离度应大于1.5,人血白蛋白对照品单体峰与二聚体峰间的分离度应大于1.5,拖尾因子按人血白蛋白单体峰计算应为0.95~1.40。

    测定法 取供试品适量,用流动相稀释成每1ml约含蛋白质12mg的溶液,取20μl),注入色谱柱,记录色谱图60分钟。按面积归一化法计算,色谱图中单体峰加二聚体峰的含量,即为IgG单体加二聚体含量。图谱各峰的界限为两峰间最低点到基线的垂直线。主峰为IgG单体;相对保留时间约0.85的峰为二聚体。

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