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磷测定法

    药品名称: 3103 磷测定法
    版本: 2020年版
    来源: 四部
    分类: 通则
    内容:

    本法系将有机磷转变为无机磷后进行磷含量测定。磷酸根在酸性溶液中与钼酸铵生成磷钼酸铵,遇还原剂即生成蓝色物质(三氧化钼和五氧化钼的混合物),称之为“钼蓝”,用比色法测定供试品中磷含量。

    测定法 精密量取供试品适量(含磷4~20μg)置试管中,加4滴硫酸(约0.08ml)加热至炭化,再加2滴高氯酸(约0.06ml)消化至无色澄清,消化完全后稍置片刻,立即加水2ml,加0.04mol/L钼酸铵溶液(称取钼酸铵5g,加水溶解并稀释至100ml)0.4ml,混匀;加还原剂(称取亚硫酸氢钠6g、亚硫酸钠1.2g、1-氨基-2-萘芬-4-磺酸0.1g,置棕色瓶中,加水至50ml,1周内使用)0.2ml,混匀;加水至6ml,15~20分钟后,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在波长820nm处测定吸光度。

    精密量取标准磷溶液(精密称取干燥至恒重的磷酸二氢钾439.3mg,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度;再精密量取2ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,即得每1ml含磷20μg的标准磷溶液)0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置试管中,各补加水至1ml,自本法前述“加4滴硫酸”起,同法操作,测定各管的吸光度。

    以标准磷溶液的系列浓度对其相应的吸光度作直线回归,然后将供试品溶液的吸光度代入直线回归方程,求岀其相应体积(ml)。

    式中 V为供试品溶液吸光度相对于标准磷溶液的体积,ml;

    CR为标准磷溶液的浓度,μg/ml;

    Vx为供试品的体积,ml。

    【附注】(1)加高氯酸消化时,必要时可加1~2滴30%过氧化氢,但最后必须将过氧化氢除尽。

    (2)加高氯酸消化后,如在冷却后加水,须再加热。

    (3)测定A群脑膜炎球菌多糖疫苗成品磷含量时,至少取3支安瓿溶解后混合备用。

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