本品系从新鲜人尿中提取的一种能激活纤维蛋白溶酶原的酶。它是由高分子量尿激酶（MW54 000）和低分子量尿激酶（MW33 000）组成的混合物，高分子量尿激酶含量不得少于90%，每1mg蛋白中尿激酶活力不得少于12万单位。 【制法要求】本品应从健康人群的尿中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》要求。本品在生产过程中应有病毒安全性控制的措施，工艺中需经60℃加热10小时，以使病毒灭活。 【性状】本品为白色或类白色粉末。 【鉴别】取效价测定项下的供试品溶液，用巴比妥-氯化钠缓冲液（pH7.8）稀释制成每1ml中含20单位的溶液，取1ml，加牛纤维蛋白原溶液0.3ml，再依次加入牛纤维蛋白溶酶原溶液0.2ml与牛凝血酶溶液0.2ml，迅速摇匀，立即置37℃+0.5℃恒温水浴中保温，立即计时。应在30～45秒内凝结，且凝块在15分钟内重新溶解。以0.9%氯化钠溶液作空白，同法操作，凝块在2小时内不溶（上述试剂的配制同效价测定）。 【检查】溶液的澄清度与颜色取本品，加0.9%氯化钠溶液溶解并稀释制成每1ml中含3000单位的溶液，依法检查（通则0901第一法与通则0902第一法），应澄清无色。 干燥失重 取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥至恒重，减失重量不得大于5.0%（通则0831）。 分子组分比 取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含2mg的溶液后，加入等体积的缓冲液［取浓缩胶缓冲液（F液）2.5ml、20%十二烷基硫酸钠溶液2.5ml、0.1%溴酚蓝溶液1.0ml与87%甘油溶液3.5ml，加水至10ml］，置水浴中3分钟，放冷，作为供试品溶液，取10M，加至样品孔，照电泳法（通则0541第五法考马斯亮蓝法染色）测定，按下式计算高分子量尿激酶相对含量（%）。 乙肝表面抗原 取本品，加0.9%氯化钠溶液溶解并稀释制成每1ml中含10mg的溶液，按试剂盒说明书项下测定，应为阴性。 异常毒性 取本品，加氯化钠注射液溶解并稀释制成每1ml中含5000单位的溶液，依法检查（通则1141），应符合规定。 细菌内毒素 取本品，依法检查（通则1143），每1万单位尿激酶中含内毒素的量应小于1.0EUo 凝血质样活性物质 血浆的制备取新鲜兔血，加3.8%枸檬酸钠溶液（每9ml兔血加3.8%枸椽酸钠溶液1ml），混匀，在2～8℃条件下，以每分钟5000转离心20分钟。取上清液在一20℃速冻保存备用，用前在25℃融化。 测定法 取本品，加巴比妥缓冲液（pH7.4）溶解并稀释制成每1ml中各含5000单位、2500单位、1250单位、625单位与312单位的供试品溶液。若供试品中含乙二胺四醋酸盐或磷酸盐，必须先经巴比妥缓冲液（pH7.4）在2℃透析除去，再配成上述浓度的溶液。 取小试管（12mm×75mm）7支，在第1管和第7管各加巴比妥缓冲液（pH7.4）0.1ml作空白对照，其余5管分别加入上述倍比稀释的供试品溶液各0.1ml，再依次加入6-氨基己酸溶液［取6-氨基己酸1.97g，加巴比妥缓冲液（pH7.4）使溶解，并稀释至50ml］与血浆各0.1ml，轻轻摇匀，在25℃水浴中，静置3分钟，加入已预温至25℃的氯化钙溶液（取氯化钙1.84g，加水使溶解并稀释至500ml）0.1ml，混匀，置水浴中，立即计时。注意观察血浆凝固，终点判断为轻轻倾斜试管置水平状，溶液呈斜面但不流动，记录凝固时间（秒）。每个浓度测3次，求平均值（3次测定中最大值与最小值的差不得超过平均值的10%）。以供试品溶液浓度的对数为纵坐标，复钙缩短时间（空白管的凝固时间减去供试品管的凝固时间）为横坐标绘图。连接不同稀释度的供试品各点，应成一直线，延伸直线与纵坐标轴的交点为供试品浓度，即凝血质样活性为零值时的供试品酶活力，按每1ml供试品溶液的单位表示，每1ml应不得少于150单位。 【效价测定】酶活力 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原，加巴比妥-氯化钠缓冲液（pH7.8）溶解并稀释制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。 牛凝血酶溶液 取牛凝血酶，加巴比妥-氯化钠缓冲液（pH7.8）溶解并稀释制成每1ml中含6.0单位的溶液。 牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原，加三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 9.0）溶解并稀释制成每1ml中含1~1.4酪蛋白单位的溶液（如溶液浑浊，离心，取上清液备用）。 混合溶液 临用前取等体积的牛凝血酶溶液和牛纤维蛋白溶酶原溶液，混匀。 标准品溶液 取尿激酶标准品，加巴比妥-氯化钠缓冲液（pH7.8）溶解并定量稀释制成每1ml中约含60单位的溶液。 供试品溶液 取本品适量，精密称定，加巴比妥-氯化钠缓冲液（pH7.8）溶解，并定量稀释制成与标准品溶液相同浓度的溶液，摇匀。 测定法 取试管4支，各加牛纤维蛋白原溶液0.3ml，置37℃±0.5℃水浴中，分别加巴比妥-氯化钠缓冲液（pH7.8）0.9ml、0.8ml、0.7ml、0.6ml，依次加标准品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml，再分别加混合溶液0.4ml，立即摇匀，分别计时。反应系统应在30～40秒内凝结，当凝块内小气泡上升到反应系统体积一半时作为反应终点，立即计时。每个浓度测3次，求平均值（3次测定中最大值与最小值的差不得超过平均值的10%）。以尿激酶浓度的对数为横坐标，以反应终点时间的对数为纵坐标，进行线性回归。供试品按上法测定，用线性回归方程求得供试品溶液浓度，计算每1mg供试品的效价（单位）。 蛋白质含量 取本品约10mg，精密称定，照蛋白质含量测定法（通则0731第一法）测定，即得。 比活 每1mg蛋白中含尿激酶活力单位数。 【类别】溶栓药。 【贮藏】遮光，密封，在10℃以下保存。 【制剂】注射用尿激酶 |
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