本法系依据4-氨基安替比林、铁氰化钾在碱性条件下与间甲酚反应生成一种红色物质,用比色法测定供试品中间甲酚含量。 测定法 精密量取一定体积的供试品,置试管中,定量稀释50倍,即为供试品溶液。量取供试品溶液1.0ml,加水5.0ml,混匀,依次加pH9.8缓冲液(称取无水碳酸钠6.36g、碳酸氢钠3.36g,加水溶解并稀释至800ml,用1mol/L盐酸调节pH值至9.8后,再加水至1000ml)、0.3%4-氨基安替比林溶液、1.2%铁氰化钾溶液及1mol/L磷酸二氢钾溶液各1.0ml,混匀,于室温避光放置10分钟,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在波长510nm处测定吸光度。 精密量取间甲酚对照品溶液(取间甲酚适量,精密称定,置量瓶中,加水溶解并稀释至每1ml含10μg)1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml,分别置试管中,加水补至6.0ml,自本法前述“依次加pH9.8缓冲液”起,同法操作,测定各管的吸光度。 以间甲酚对照品溶液的系列浓度对其相应的吸光度作直线回归,将供试品溶液的吸光度代入直线回归方程,得供试品的间甲酚含量(mg/ml)。 |